医院骑士团日常修道生活的基本准则是由第二任大团长雷蒙制定的，核心精神是安贫乐道、同吃同住、贞洁与服从。团内制定有详细的修行时刻表，每位团员都要遵守。骑士们也必须参加各种宗教活动，不过由于很多战士目不识丁，他们只能被动地听一听布道，简单地说出几个拉丁语祷告词。一年当中，骑士被要求至少参加三次圣餐礼（分别在圣诞节、复活节和五旬节）。每天晚上修士们还会为病人做祷告。
参加晚祷（Compline）后，团员们就上床就寝了（原则上禁止外出），第二天一早便起床参加晨祷（Matins）。在宿舍里他们被禁止大声喧哗，也不得裸睡（除了中东地区最炎热的时节）或与战友同床（即使在最寒冷的冬日），夜间有火烛长明不熄。但是1170 年以后，随着一些高级骑士对私人房间的渴求，以上规定有所松动。
原则上，骑士们应该集体进餐（不过某些高级成员可以独自进餐），并且和修士一样，只能食素（可以吃鱼）。但是这一规定慢慢地也有所变通，尤其在战时，毕竟骑士们需要肉类来补充营养，保证战斗力。在特殊情况下，他们也能获得额外食物及酒水的配给。骑士团的斋戒期也比普通修士短很多，并且集中在冬天（一般来说，春夏时节是战争高发期，而冬季一般休战）。此举同样是为了避免骑士的体质过于虚弱。甚至在战争期间，对骑士们“食不言”的要求也放松了。尽管如此，还是有脾气暴躁的骑士对各种清规戒律不满，在就餐时谩骂甚至殴打侍者。
按照同时代的标准，医院骑士团的伙食是相当不错的。他们一日两餐，第一餐在第五次祈祷（nones）后，第二餐在晚祷后（晚餐禁止饮酒），每餐一般会上菜两次（供值班人员轮换）。他们的食物主要是肉、鱼、鸡蛋、面包和酒，可谓营养丰富。当然斋戒期禁止吃肉，大斋期（Lent） 甚至禁止享用牛奶，周五则不能吃鸡蛋与奶酪。不过如果在海上执勤，这些禁令就放宽了。
（上图）利勒亚当率部首次登上马耳他岛，法国画家勒内·泰奥多尔·贝尔东绘制
医院骑士最常用的餐具是陶制的， 质地做工都比较简朴，包括常见的陶碗、盘、钵等。其次为玻璃制，常见的为玻璃酒杯和玻璃水瓶。圣殿骑士团在阿卡附近甚至拥有自己的玻璃厂，可以生产高档的彩色玻璃。13 世纪以后，饮酒也变得普遍起来。饭后骑士们一般还会去教堂做一番感恩祷告。
1203 年颁布的医院骑士团的团规中要求食物不能奢侈，无论地位高低， 所有骑士的饮食需一视同仁。进餐时禁止言语喧哗。骑士团相信食肉会令人腐化，但在节庆日的宴会上可以例外。此后禁令慢慢松弛。家畜主要包括马、牛、猪、羊。医院骑士团贝尔蒙特（Belmont）城堡的考古挖掘显示，在他们的肉食中，羊的比例最高，其次是猪和牛。家禽中，则以鸡居多。鱼通常不被视作荤菜，故不受限制。骑士团建有谷仓贮存谷物。中世纪时期，磨坊和面包房是具有垄断性质的特殊资产。骑士团拥有自己的水磨、风磨及面包烤坊， 不但能自给自足，还能对外出租盈利。传统上骑士团会为穷人免费分发面包，那些应该就是自家磨坊、面包房的产品。通常每一座城堡都会设有自己的面包房。
在欧洲的医院骑士以农业、慈善与行医为主业，而在中东军事训练压倒了一切， 不过他们的训练时间主要集中在下午（可能是为了避开炎炎烈日）。有证据显示一周中大约三天用于军事训练，项目有体操、摔跤、兵器练习、十字弓射击等等。对骑士的军纪要求也是很严格的，例如他们被禁止参与一切狩猎（包括鹰猎）和比武，甚至纵马疾驰也需事先得到上峰批准。对纪律的遵守是医院骑士团得以安身立命的根本所在，不过，要指控一名骑士触犯了条例也并非易事，这需要修士会议共同研究决定。如果骑士在修士会议以外私自控诉队友的过失，则可能会因诽谤罪遭到惩罚。因此，类似的指控和调查往往非常繁复且旷日持久。一次完整的指控需要三方面的要素：正式的起诉书、罪证，以及修士会议的最终决议。对违规者的惩罚措施各个骑士团大同小异，对于轻罪（如就餐时举止不当、懒惰等），一般的处罚是禁食禁酒一段时间；严重一些的则判处苦修，时间从七天到四十天不等；最严重的处罚是开除。
骑士的葬礼也有一整套礼仪。12 世纪时，骑士团会用团旗覆盖棺椁，周围放满蜡烛，并由修士吟诵圣歌。1278 年后改用该骑士的斗篷一同下葬。每年他的忌日都会标注在所属修士会的日历上。团规还要求为去世骑士所作的弥撒要达到30 场。在耶路撒冷的总会每晚都有5 个修士为骑士团的恩人们吟诵圣诗（Psalter），而在四旬斋的第一个周日会举行一场神圣的安魂弥撒来纪念去世的骑士团先贤。
骑士团夺取拜占庭的罗德岛后，扩建了原来的总督府，把它改为大团长宫，并将城墙环绕的罗德城变成了自己的领地（所谓的“科拉乔区”，最终成为罗德港“内城”）， 同时让大量希腊居民迁至郊区（最终形成罗德港“外城”）。科拉乔区主干道的起点是市区中心广场，附近是大团长宫和骑士团大教堂；终点处则是兵工厂及主城门。街道两旁都是骑士团的建筑，其中包括各语言区的会馆。骑士们也不再混居于一个大型的宿舍中（圣地传统），而是按照不同语言居住在更小型化的宿舍里（塞浦路斯时期形成的习惯）。不过罗德岛时期，大部分骑士已经不愿意居住于集体宿舍， 他们在城区内有了自己的宅邸。集体宿舍一般提供给新人和访客。当然，重大集体活动依然会在集体宿舍中举行。
骑士团治下的科拉乔区及附近有城墙保护的“郊区”令人印象深刻。例如，1345 年一位英国访客曾这样描述道：“城墙内有一位大主教及其主教座堂， 市民的住宅也都特色鲜明，与其身份职业吻合。这里有铸币师、盔甲匠和所能想到的各种能工巧匠。要塞之下则是骑士团的总医院，那里有医生、护士和侍女来照顾伤患。”
罗德岛市内通行多种语言，骑士、普通市民与商人来自五湖四海。1521 年的一位来访者说当地人所用的语言过多以致相互干扰，最终每个人的语言都带点其他语言的特色。大部分骑士都能说一点希腊口语，但对古典希腊语及其典籍则一窍不通。不过希腊语却是骑士团与土耳其人间通用的外交语言（骑士们一般不会土耳其语）。有时候阿拉伯语也用作外交及商业语言。
14 世纪末至16 世纪初，除去个别时期，多数情况下医院骑士团同埃及马穆鲁克王朝都保持了良好关系。1403 年，二者签署了正式合约，医院骑士团作为圣地基督徒保护者的特殊身份得到了确认。双方同意若要采取军事行动，应提前三个月告知对方（但这一充满友好精神的条款经常被骑士团麾下的基督教海盗所打破）。医院骑士团还被特许在埃及达米埃塔开设领事馆，以处理战俘赎金问题（骑士团已经改变了过去屠杀男性穆斯林俘虏的恶习）及粮食买卖。这些俘虏大部分成了划桨奴隶，不过也有部分出身高贵的囚徒被软禁起来以换取高额赎金。
在欧洲的医院骑士生活就要平淡很多了，因为他们处于和平环境，更多地将精力放在农庄或修道院上。修道院长或骑士指挥官与他手下的农夫间的关系总体是良好的。甚至有新到任的骑士率先向农夫们宣誓保障其安全，而后农夫才向主公宣誓尽忠的案例。有时候为了表明主人与隶农间的和谐关系，他们还会一道进餐（虽然是象征性的）。在有些地方，骑士通过限制当地面包烤房的数量来控制农夫。农夫为了获得口粮，不得不上缴面包的二十分之一作为获准使用烤炉的代价。
14 世纪，招募的新兵中文盲过多一度给骑士团带来困扰。此后，医院骑士团的整体文化水平渐渐提高了，但并不平均。骑士团高层中不乏饱学之士。例如，大团长胡安·费尔南德斯·埃雷迪亚曾经鼎力支持阿维尼翁教廷的文化事业，他修建了一座大型图书馆，鼓励法国学者与希腊学者及佛罗伦萨学者相互交流切磋。埃雷迪亚不是以武功，而是以文化赞助人的身份在医院骑士团名垂青史。罗德岛自身一度也成为早期希腊学的中心之一，并吸引了各地学者，其中就包括英国人威廉·利利（William Lily，1468—1522，英国语法家、学者，伦敦圣保罗学校第一任校长）。
随着医院骑士团国的建立，骑士团越发世俗化。昔日“三愿”誓言的约束力也开始松动，尤其是在私人财产上。
与穆斯林邻居不同，三大骑士团总体而言厌恶沐浴，他们倾向于认为这并非必要的卫生措施，而是一种令人腐化的娱乐（团规中常常将沐浴同其他娱乐并列），因此予以种种限制。例如条顿骑士团团规中规定，只有患病的骑士可以自由沐浴， 否则就必须提前获得上级批准。医院骑士团在阿卡陷落后不久颁布的法令中，明确指出团员除非万不得已，否则禁止沐浴。在炎热的东方，限制洗浴有些令人费解。不过骑士团并非真正抵制沐浴，前提是能得到有效监管。医院骑士团在贝尔沃城堡内就建有自己的浴室。骑士团的浴室从结构上看是典型的东方式，主要的房间为更衣室，墙壁一侧安置着长凳，旁边的房间则为浴池。必要时医院骑士也剃须，在贝尔沃城堡就曾发掘出两把铁制剃须刀。
不过骑士团并非真正抵制沐浴，前提是能得到有效监管。医院骑士团在贝尔沃城堡内就建有自己的浴室。骑士团的浴室从结构上看是典型的东方式，主要的房间为更衣室，墙壁一侧安置着长凳，旁边的房间则为浴池。必要时医院骑士也剃须，在贝尔沃城堡就曾发掘出两把铁制剃须刀。
本文摘自《医院骑士团九百年》
